De koppige Dokter Gregory House (Hugh Laurie) is een medisch genie die altijd de ‘puzzel’ op wil lossen. Die puzzels betreffen vaak patiënten die een zeldzame ziekte hebben waarvan de diagnose moeilijk kan worden gesteldt. Samen met zijn team van medische experts, is het hun taak de patiënt weer gezond naar huis te krijgen. Dit doen ze vannuit het Princeton Plainsboro Teaching Hospital.
Dr. House zijn team bestaat uit immunoloog Dr. Allison Cameron (Jennifer Morrison), neuroloog Dr. Eric Foreman (Omar Epps) en IC-arts Dr. Robert Chase (Jesse Spencer).
Vaak wanneer er een wat riskanter onderzoek gedaan moet worden moet er toestemming worden gevraagd aan het hoofd van het Princeton Plainsboro Teaching Hospital, Dr. Lisa Cuddy (Lisa Edelstein). Zij is tevens een endocriloog.
House is bevriend met het hoofd van de afdeling oncologie: Dr. James Wilson (Robert Sean Leonard).
In het vierde seizoen neemt het team van House ontslag waardoor hij opzoek moet naar vervanging. Hij vindt drie van de veertig kanidaten geschikt: plastische chirurg Dr. Chris Taub (Peter Jacobson), internist Dr. Remy Hadly ”Thirteen” (Olivia Wilde) en Dr. Lawrence Kutner (Kal Penn) die gespecialiseerd is in sport en herstel. Ook is Dr. Eric Foreman weer terug omdat hij elders geen werk kon vinden.
Als in seizoen 5 Dr. Lawrence Kutner zelfmoord pleegt, moet House noodgedwongen op zoek naar een vervanger. Oud team lid Dr. Robert Chase sluit zich weer aan bij het team.
In seizoen 7 verlaat Dr. Remy Hadly “Thirteen” zonder duidelijke reden het team, waardoor de slimme -talentvolle studente Marta M. Masters (Amber Tamblyn) zich bij het team aansluit.
